IntipDaqu LIPI

PROSES PEMBUATAN PROTEIN BIOTIN CARBOXYLASE SUBDOMAIN B REKOMBINAN YANG DIISOLASI DARI LACTOCOCCUS LACTIS SUBSP. LACTIS (LAC3) PADA INANG ESCHERICHIA COLI BL21 (DE3) SEBAGAI TARGET SKRINING UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI

Invensi ini berkenaan dengan proses pembuatan protein biotin carboxylase subdomain B rekombinan yang diisolasi dari genom Lactococcus lactis subsp. lactis (Lac3) menggunakan inang Escherichia coli BL21 (DE3). Tahapan dalam invensi ini adalah identifikasi gen, pemodelan struktur, analisis stabilitas dan fisikokimia, pemodelan penambatan molekuler, isolasi gen, kloning pada pGEM-T Easy, kloning pada pET-SUMO, ekspresi pada Escherichia coli BL21(DE3), dan karakterisasi protein rekombinan menggunakan SDS-PAGE, dot blot, dan western blot. Protein biotin carboxylase subdomain B tersusun atas 2 α-helix dan 3 β-sheet dan memiliki tingkat kelarutan tinggi. Pengikatan biotin carboxylase subdomain B terhadap ATP memiliki energi afinitas sebesar -6.1 kkal/mol. Gen biotin carboxylase subdomain B berukuran sebesar 348 pb. Ekspresi protein biotin carboxylase subdomain B rekombinan dalam inang Escherichia coli BL21 (DE3) dilakukan dengan induksi menggunakan 0,2% laktosa dan inkubasi pada suhu 20ᴼC. Karakterisasi protein menunjukkan protein biotin carboxylase subdomain B rekombinan dengan ukuran 28,89 kDa, yang masih terikat dengan His-Tag. Protein biotin carboxylase subdomain B rekombinan dalam invensi ini dapat dimanfaatkan namun tidak terbatas sebagai target untuk skrining uji aktivitas antibakteri.

P00202304793

30 Mei 2023

2023

2023-1676530301-jkhj

Pusat Riset Rekayasa Genetika

rifqiyahnurumami@gmail.com

Badan Riset dan Inovasi Nasional

Paten

Bioteknologi

2

-

-

-

-

0

-

• Pendaftaran Paten_P00202304793
• Persyaratan Formalitas Telah Dipenuhi

• Rifqiyah Nur Umami
  ( Pusat Riset Rekayasa Genetika )
• A. Zaenal Mustopa
  ( Pusat Riset Rekayasa Genetika )
• Fatimah
  ( Pusat Riset Rekayasa Genetika )

• Rafika Dwi Cahyani
  ( IPB University )