METODE DETEKSI CEPAT, SEDERHANA DAN HEMAT PADA KOLONI HASIL TRANSFORMASI ESCHERICHIA COLI DH5α YANG MENGANDUNG PLASMID PGREEN0229+CRYIAB-IAC MENGGUNAKAN PCR
Paten
METODE DETEKSI CEPAT, SEDERHANA DAN HEMAT PADA KOLONI HASIL TRANSFORMASI ESCHERICHIA COLI DH5α YANG MENGANDUNG PLASMID PGREEN0229+CRYIAB-IAC MENGGUNAKAN PCR
Invensi ini berkaitan dengan metode deteksi cepat, sederhana dan hemat pada koloni Escherichia coli DH5α yang mengandung plasmid pGreen0229+cryIAb-IAc menggunakan PCR. Tahapan invensi yang terdiri dari beberapa tahap diawali konstruksi plasmid pGreen0229+cryIAb-IAcmeliputi isolasi DNA plasmid pCambia5300 dan pGreen0229, restriksi DNA plasmid menggunakan enzim restriksi HindIII dan KpnI, islosasi fragmen gen cryIAb-IAc dan pGreen0229, ligasi fragmen gen cryIAb-IAc dengan bantuan enzim T4-DNA ligase, dan transformasi hasil ligasi ke dalam E. coli DH5α melalui metode heatshock. Hasil transformasi ke dalam E. coli DH5α yang ditumbuhkan pada media seleksi LB-agar mengandung kanamisin 50 mg/l. Konfirmasi keberhasilan konstruksi plasmid pGreen0229+cryIAb-IAc dilakukan menggunakan metode cepat, sederhana dan hemat menggunakan dengan PCR langsung dari koloni bakteri yang tumbuh pada media LB-agar yang mengandung kanamisin 50 mg/l tanpa melakukan isolasi DNA plasmid. Hasil deteksi adanya gen cryIAb-IAc delakukan dengan reaksi PCR menggunakan primer spesifik gen cryIAb-IAc yang menghasilkan amplicon berukuran sekitar 316 bp.
S00202410207
27 September 2024
2024
2024-1711360561-th8x
B-1286/III.5.1/FR.04.00/3/2024
Pusat Riset Rekayasa Genetika
edy_listanto@yahoo.com
- Edy Listanto
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Eny Ida Riyanti
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Bernadetta Rina Hastilestari
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Sri Koerniati
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Alfia Annur Aini Azizi
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Enny Sudarmonowati
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Rikno Harmoko
( Pusat Riset Rekayasa Genetika )
- Prof. Dr. Ir. Bambang Sapta Purwoko, M.Sc.
( Institut Pertanian Bogor ) - Dr. Sintho Wahyuning Ardie, S.P., M.Si.
( Institut Pertanian Bogor ) - Nanda Adya Sasmita, S.P.
( Institut Pertanian Bogor )