PROSES PRODUKSI, PURIFIKASI, DAN KONVERSI PREKURSOR HUMAN INSULIN REKOMBINAN
Paten
PROSES PRODUKSI, PURIFIKASI, DAN KONVERSI PREKURSOR HUMAN INSULIN REKOMBINAN
Invensi ini merupakan proses produksi, pemurnian, dan konversi prekursor human insulin rekombinan (rHIP) dengan menggunakan khamir Pichia pastoris sebagai inang untuk ekspresi. Prekursor rHIP merupakan rantai tunggal dengan formula EEAEAEAEPK-B(1-29)-DGK-A(1-21) yang diubah menjadi rHI matang melalui proses tripsinisasi dan transpeptidasi dengan menghilangkan peptida spacer (EEAEAEAEPK) dan linker (DGK) dari rHIP beserta penambahan satu asam amino threonine pada posisi rantai B30. Produksi rHIP dengan metode induksi pulse maupun fed batch dilakukan dalam bioreaktor dengan volume kerja 1 liter. Protein rHIP dimurnikan dengan metode kromatografi penukar kation baik secara manual maupun sistem yang dikendalikan komputer. Pengubahan rHIP menjadi rHI dalam invesi ini dilakukan dengan tahap pertama tripsinisasi dan transpeptidasi, kemudian tahap kedua kristalisasi dan deproteksi. Pada akhir setiap tahapan, protein target dimurnikan dengan kromatografi reversed phase. Produksi dan purifikasi dari rHI yang diklaim dalam invensi ini mampu menghasilkan rHI yang memiliki aktivitas secara in vitro.
P00202315136
31 Desember 2023
2023
2023-1690170284-o0vj
B-3674/III.5.4/HK.00/7/2023
Pusat Riset Mikrobiologi Terapan
eko.wahyuputro@gmail.com
Badan Riset dan Inovasi Nasional
Paten Biasa
Bioteknologi
10
0
-
- Eko Wahyu Putro
( Biro Organisasi dan Sumber Daya Manusia ) - Dini Nurdiani
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Wien Kusharyoto
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Hariyatun
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Nuruliawaty Utami
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Endah Puji Septisetyani
( Pusat Riset Rekayasa Genetika ) - Pekik Wiji Prasetyaningrum
( Pusat Riset Rekayasa Genetika )