KONSTRUKSI ALKALIN FOSFATASE POLIMER DENGAN TYROSINE-TAG DAN KATALISIS ENZIM LAKASE DAN PENGGUNAANNYA SEBAGAI REPORTER ENZYME DALAM ENZYMELINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA)
Paten
KONSTRUKSI ALKALIN FOSFATASE POLIMER DENGAN TYROSINE-TAG DAN KATALISIS ENZIM LAKASE DAN PENGGUNAANNYA SEBAGAI REPORTER ENZYME DALAM ENZYMELINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA)
Invensi ini berkaitan dengan konstruksi alkaline fosfatase dari bakteri (bacterial alkaline phosphatase (AP)) polimer dengan bantuan tyrosine-tag (Y-tag) yang terdapat pada pada ujung-N dan ujung-C AP dan katalisis enzim lakase. Lebih khusus lagi, invensi ini berhubungan dengan reaksi crosslinking antara BAP yang memiliki tyrosine-tag (Y-tag) yaitu BAP-Y dengan kimera antibody binding protein (ABP) yang juga memiliki tyrosine-tag (Y-tag) yaitu Y-pG2pA-Y, yang dikatalisis oleh enzim lakse sehingga menghasilkan heteropolimer BAP-Y/Y-pG2pA-Y. Heteropolimer BAP-Y/Y-pG2pA-Y ini dapat berperan sebagai reporter enzyme pada aplikasi enzyme immunoassay (EIA) khususnya enzymelinked immunosorbent assay (ELISA). Reaksi crosslinking antara BAP-Y dan Y-pG2pA-Y dilakukan secara in vitro yang dikatalisis enzim lakase dari Trametes sp dengan menggunakan buffer 10 mM Tris-HCl pH 8,0. Heteropolimer BAP-Y/Y-pG2pA-Y yang sudah dimurnikan kemudian digunakan sebagai reporter enzyme pada aplikasi ELISA untuk mendeteksi anti-ovalbumin (OVA) IgG. Penambahan OVA pada 96-well plate ELISA dilakukan dengan konsentrasi yang berbeda dari 10 ng/mL sampai dengan 1000 ng/mL.
P00202314478
21 Desember 2023
2023
2023-1699452106-up0j
B-5991/III.5.4/HK.00/10/2023
Pusat Riset Mikrobiologi Terapan
dani.per1620@gmail.com
Badan Riset dan Inovasi Nasional
Paten Biasa
Bioteknologi
3
0
-
- Dani Permana
( Pusat Riset Mikrobiologi Terapan ) - Ade Andriani
( Pusat Riset Mikrobiologi Terapan ) - Eva Agustriana
( Biro Organisasi dan Sumber Daya Manusia ) - Aerma Hastuty
( Pusat Riset Mikrobiologi Terapan ) - Trismilah
( Pusat Riset Mikrobiologi Terapan )